Реферат: Методы микробиологической диагностики
Идентификация микроорганизмов
Тема 3.2. ИДЕНТИФИКАЦИЯ БАКТЕРИЙ
Изучение микроорганизмов невозможно без распознавания принадлежности отдельных их колоний к тем или иным биологическим видам, типам, родам и т. Процесс аутентификации организмов является одним из самых важных и трудоемких этапов проведения биологических исследований. В бактериологии раздел микробиологии эта процедура носит название идентификация бактерий. Метод познания того или иного предмета представляет собой комплекс мер по решению определенной задачи. Методы идентификации различных микроорганизмов разрабатывались микробиологами и бактериологами на протяжении многих лет, и сегодня эти методы активно используются в науке, медицине, фармацевтике и даже в промышленном производстве в том числе и продуктов питания. Основными методами распознавания бактерий являются:. Врачи открыли новую причину появления неприятного запаха изо рта: Перечисленные методы представляют собой основу для исследователей и являются базисом для большого количества методик, которые позволяют определять такие свойства бактерий, как:. Установление специфических свойств дает возможность исследователю составить максимально полное представление о выделенной культуре бактерий. Несмотря на вековую историю изучения микроорганизмов, микробиология и сегодня испытывает сложности в изучении бактерий. Причина тому — микроскопические размеры самих организмов и продуктов их жизнедеятельности. Трудности присутствуют на всех стадиях. Всего основных стадий пять:. Порядок реализации каждой стадии зависит от того, идентификация на какие бактерии должна быть выполнена исследователем аэробные, неферментирующие, грамотрицательные и т. Идентификация любых бактерий невозможна без выделения чистой культуры. Это требование в микробиологии связано с тем, что присутствие микробов других родов и семейств во время проведения бактериологических исследований всегда существенно искажает результаты, вследствие чего исследователь производит неверные заключения. Для выделения чистой культуры используются различные методы, большинство из которых основано на бактериальных чашечных посевах:. Так, например, для выделения чистой аэробной кислородозависимой культуры практикуется следующая методика:. Полученные образцы с аэробными сообществами могут изучаться в свете идентификации на бактерии определенных родов. Практически при каждом бактериологическом исследовании в микробиологии бактериолог проводит проверку культуры по Граму так называемое окрашивание по Граму. Это исследование дает возможность выявить наличие в образце грамотрицательных микроорганизмов. Грамотрицательные бактерии имеют особым образом устроенную клеточную стенку, которая состоит из нескольких белковых слоев белок муреин. Вследствие такого устройства клеточной стенки, в грамотрицательных бактериальных клетках транспорт веществ внутрь клетки и за ее пределы имеет свои специфические черты. Это обстоятельство является важным при изучении биохимической активности грамотрицательных микроорганизмов. Без изначального определения особенностей строения клеточной стенки невозможно правильно подобрать питательную среду для дальнейшего культивирования и изучения грамотрицательных бактерий. Chokolate Slim удаляет жировые клетки! В результате изучения ферментативной активности бактерии синтез определенных ферментов исследователи могут давать достоверные заключения о принадлежности микроорганизмов к тем или иным биологическим родам, семействам и даже видам. Ферментативная активность исследуется по пяти основным направлениям:. Интерпретация результатов проведенных исследований и тестов производится с соблюдением следующих трех принципов:. Эталонные штаммы чаще всего представлены на планшетах тест-систем, которые позволяют завершить идентификацию бактерий определенного рода по исследованным биохимическим признакам. Для родов бактерий этого типа НГОБ разработаны специализированные тест-системы, позволяющие определить принадлежность микроорганизмов к определенным группам. Определяется присутствие НГОБ по биохимическому составу питательных сред, на которых выращивались исследуемые бактериальные колонии. Особенность неферментирующих микробов состоит в том, что они не разлагают молекулы глюкозы, а используют ее в качестве окислителя гликолиз. К основным родам неферментирующих бактерий относятся аэробные Pseudomonas, аэробные Acinetobacter, аэробные Burkholderia, аэробные Stenotrophomonas. Идентификация на НГОБ позволяет определить наличие патогенных микроорганизмов в собранных образцах и вовремя предпринять меры по предотвращению распространения инфекции. Этот вид распознавания микроорганизмов применяется для идентификации антигенов бактериальной культуры. Серологические исследования проводятся с использованием иммунной диагностической сыворотки, по которой изучаются иммунные реакции исследуемых микроорганизмов:. Реакция агглютинации заключается в констатации выпадения осадка агглютината , который появляется в результате взаимодействия бактериальной клетки с определенными антителами. Серологическая реакция преципитации заключается в выявлении антигенов, вырабатываемых определенными микробами на антитела, с образованием характерного мелкозернистого осадка. Колоссальное количество неидентифицированных микроорганизмов, которые постоянно окружают человека в быту, может нести потенциальную угрозу для здоровья и даже для жизни. Так, микробиологами было исследовано наличие представителей рода спорообразующих бактерий Bacillus в колбасных и мясных продуктах, которые реализуются с полок магазинов. Как выяснилось, патогенные Bacillus присутствуют во всех видах колбас и в обработанных мясных продуктах:. При этом не стоит упускать из виду, что спорообразующие аэробные Bacillus при возникновении благоприятных условий для роста и размножения являются самыми опасными возбудителями инфекционных заболеваний, а при неблагоприятных — образуют термоустойчивые споры и готовы ждать своего часа сколь угодно долго. И вы уже задумывались о радикальных мерах? Оно и понятно, ведь стройная фигура - это показатель здоровья и повод для гордости. Кроме того, это как минимум долголетие человека. Поэтому мы рекомендуем прочитать историю Полины Гагариной, которой удалось сбросить лишний вес быстро, эффективно и без дорогостоящих процедур Статья очень интересная, но несколько сложная с точки зрения обывателя. Тем не менее, в ней содержится очень нужная информация — нас окружают множество бактерий, многие из которых мало изучены. Во многих мясных продуктах содержатся споры бацилл — возбудителей сибирской язвы, и это значит, что при несоблюдении технологии производства колбас, сосисок, сроков и правил их хранения возможно заражение и даже вспышка этого заболевания. Такое не так давно случилось у нас в Омске — вспышка сибирской язвы при употреблении пельменей, был даже смертельный исход. Кстати, у нас в кишечнике обитают возбудители столбняка и газовой гангрены, и тем не менее, мы живы все дело в том, что их рост сдерживают полезные бифидо- и лактобактерии. Поэтому — пейте кефир, бифидок — и будете здоровы! А как по мне, то всё очень доступно изложено, если учесть, что тема довольно сложная, содержащая много терминов и научных понятий. Наконец разобралась, что такое грамотрицательные бактерии. Часто слышала этот термин, но что именно представляет собой этот анализ по Граму не знала! Очередное пополнение интеллектуальной копилки! Спасибо авторам, трудящимся на сайте! В который раз убеждаюсь, что мир бактерий настолько огромен и сложно изучаем. Этим невидимым жителям удается существовать по своим правилам, законам, и нам, людям, приходится подстраиваться под них, а не наоборот. Чего только стоят методы изучения этих крох, которыми пользуется научный мир. Попробуй найти оптимальный вариант для диагностики вида бактерий — задача не из простых. Но насколько важно правильно определить, какие именно бактерии в том или ином веществе. От этого зависит здоровье не только отдельного человека, но и целой нации. Все статьи на сайте носят исключительно ознакомительный характер. В статьях, описывающих ту или иную болезнь, нет призыва к действию. Если Вы обнаружили у себя подобные симптомы, Вам обязательно необходимо обратиться к врачу! Самолечение может быть опасным для Вашего здоровья! Бактерии природа человек и животные медицина разновидности жизнедеятельность органоиды интересное Грибки Вирусы Другие микроорганизмы Учебные материалы Купить Заказать Рассчитать стоимость Стать автором Запись к врачу. Вы — одна из тех миллионов женщин, которые борются с лишним весом? А все ваши попытки похудеть не увенчались успехом? Просто втирайте в ноготь Даже самые глубокие морщины пропадут за 3 дня, если на ночь Болезненная косточка на ноге растворится за сутки, если приложить теплый Глисты жрут вас изнутри! Это КОПЕЕЧНОЕ средство избавит от паразитов уже за неделю! Убрать живот за 5 дней - реально! Девушка каждый день втирала Все папилломы и бородавки уходят за 14 дней, если мазать их простым.. Как избавиться от долгов и разбогатеть, не напрягаясь? Денежный совет от Мерилин Керро. ГРИБОК ногтя проходит за 3 дня! К каким последствиям в организме приводит появление кишечной палочки E. О чем говорит наличие бактерии coli в моче? Жизнь на планете всем обязана анаэробным и аэробным бактериям. Аэробные и анаэробные бактерии различаются отношением к кислороду в окружающей Открытие грамотрицательных и грамположительных бактерий — это открытие, которое стало Есть как полезные, так и вредные бактерии, поэтому однозначно нельзя сказать Отношусь философски. Мы лишь гости в их мире Мне очень интересен мир бактерий и весь микромир в целом Не хочу отвечать Затрудняюсь ответить, не думал об этом Я их не вижу, поэтому они меня не беспокоят Злейшие враги, всегда пользуюсь антибактриальными средствами Добавить свой ответ. Сильная потливость организма вызванная паразитами под кожей. Эти убийцы выйдут комом если …. Грибок ногтя, даже запущенный, уйдет навсегда уже к утру, если взять.. Чтобы потенция была в порядке, размешивайте в воде натуральный…. Все морщинки и носогубные складки разгладятся за неделю! Без ботокса и химии! Она пройдет за 2 дня, если мазать на ночь…. Глисты и паразиты боятся как огня обычного дешевого… Читать далее. Бесплатный совет ведьмы Ванг: Чтобы деньги падали с неба, нужно вечером… Читать далее. Как избавиться от 15 кг жира в течение 20 дней?
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны. Целью выполнения курсового проекта является изучение методов анализа видового состава и идентификация микроорганизмов. В работе приведено описание видов и методов оценки развития микроорганизмов в водной среде и пищевых продуктах, бактериальной и грибной порчи пищевых продуктов и связи нормативной документации оценки содержания бактерий и грибов в пищевых продуктах. Описаны основные методы микробиологического контроля и идентификации микроорганизмов. В ходе выполнения экспериментальной части курсового проекта были изучены методы определения общего содержания бактерий и грибов, методы центрифугирования и фильтрации микроорганизмов. Проведена оценка влияния антимикробных веществ на содержание и видовой состав микроорганизмов. Изучено взаимоотношение грибов и бактерий в смешанной микрофлоре. Микроорганизмы чрезвычайно широко распространены в природе. В пищевой промышленности вода играет важную роль, она используется для мойки сырь и аппаратуры, применяется в качестве основного технологического сырья при изготовлении различных видов продукции. Одним из принципов производства безопасной продукции является обеспечение надлежащего санитарно-микробиологического состояния производства. Производственное оборудование, коммуникации, воздух в производственных помещениях, тара для расфасовки, а также непосредственно сырье при несоблюдении ряда санитарно-гигиенических нормативов или недостаточно эффективной санитарной обработке, могут стать основными источниками инфицирования всего производства, что окажет негативное влияние на физико-химические и микробиологические показатели готовой продукции. Продукты жизнедеятельности патогенных микроорганизмов, микотоксины, попадающие в технологический процесс, снижают качество производимых пищевых продуктов. Целью данной работы является изучить методы видового состава и идентификации микроорганизмов. Для этого проведем опыты с использованием различных пищевых продуктов, предварительно теоретически ознакомившись с методами оценки безопасности, особенностями жизнедеятельности микроорганизмов. Пищевые продукты ежедневно потребляемые человеком, не стерильны, то есть всегда содержат какое-то число клеток микроорганизмов. Часть этих микроорганизмов безвредна и даже желательна для человека, так как защищает ею от патогенных микроорганизмов, являясь их антагонистами. Каждый продукт - это арена деятельности и сложного микробного биоценоза. На подвижное равновесие этого биоценоза могут оказывать влияние самые разнообразные факторы и взаимосвязи, направляя его деятельность либо в нужном, либо в нежелательном направлении. Одни и те же виды микроорганизмов в одних продуктах могут играть полезную роль, а в других нежелательную и даже вредную. В одни продукты специально вносят микроорганизмы в виде различных заквасок, в других продуктах стремятся избавиться от этих же микроорганизмов. Повседневный санитарно-бактериологический контроль производимого пищевого продукта позволяет контролировать динамику общего санитарного режима производства, выявлять его слабые звенья и устранять их. Контроль необходимо проводить на всех этапах производства. Исследование только конечного продукта не отражают общего санитарного состояния предприятия. Важное значение имеет контроль соблюдения технологических условий производства, особенно тех продуктов, технология которых предусматривает термическую, химическую или какую-либо иную обработку. При этом необходимо установить количественно и качественно допустимые пределы содержания микроорганизмов после соответствующей обработки и на последующих этапах производства, упаковки, транспортировки, хранения и реализации. Несоответствие продукта установленным санитарным нормам сразу после производства укажет на несоблюдение технологического режима, а обнаружение санитарного неблагополучия на последующих этапах на вторичное обсеменение выявлены в результате санитарно-бактериологического обследования. В зависимости от особенностей приготовления и условий последующего хранения устанавливают сроки хранения продукта. Соблюдение условий и режима хранения контролируются санитарно-бактериологическим исследованием, четко определяющим отклонения от установленного режима. При этом необходим анализ выявляемого микробного сообщества с учетом роли отдельных бактериальных показателей, характера продукта и специфики его хранения. В процессе хранения продукта может происходить размножение микроорганизмов, которое приводит к порче продукта [1]. Бактериальная порча продуктов наступает при неправильных условиях хранения что приводит к быстрому развитию микроорганизмов. К возбудителям порчи пищевых продуктов относят гнилостные, маслянокислые бактерии, пропионокислые бактерии, энтерококки, термоустойчивые молочнокислые палочки и фаги вирусы, поражающие бактерии. Гнилостные бактерии вызывают распад белков. Антагонистами гнилостных являются молочнокислые бактерии, и гнилостный процесс протекает только там, где не идет молочнокислое брожение. Среди гнилостных бактерий есть спорообразующие аэробы бактерии рода Bacillus и анаэробы Clostridium. Бесспоровые формы представлены пигментными бактериями Pseudomonas и Serratia и факультативно-анаэробными Proteus vulgaris, Escherichia coli. Маслянокислые бактерии род Clostridium являются возбудителями маслянокислого брожения. Маслянокислые бактерии сбраживают молочный сахар и соли молочной кислоты. В результате брожения кроме масляной кислоты образуются уксусная, пропионовая и муравьиная кислоты, этиловый, бутиловый и пропиловый спирт. При этом выделяется большое количество газов СО 2 , Н 2. Известно несколько типов маслянокислого брожения, они различаются образуемыми продуктами. Конечными продуктами одного из типов брожения являются масляная и уксусная кислоты, диоксид углерода и водород:. При другом типе маслянокислого брожения получаются бутиловый, изопропиловый спирты и ацетон. Возбудителем пропионовокислого брожения являются бактерии рода Propionibacterium. Они превращают глюкозу или молочную кислоту в пропионовую и уксусную кислоты с выделением диоксида углерода. Одновременно образуется небольшое количество янтарной кислоты, ацетоина и диацетила. Если брожение начинается с глюкозы, то до образования пировиноградной кислоты процесс идет аналогично гомоферментативному молочнокислому брожению. Суммарное уравнение сбраживания глюкозы пропионовокислыми бактериями:. Если брожению подвергается молочная кислота, то в результате дегидрирования с помощью лактатдегидрогеназы она также превращается в пировиноградную кислоту. В дальнейшем одна часть пировиноградную кислоты подвергается окислительному декарбоксилированию с образованием уксусной кислоты:. Другая часть пировиноградную кислоты путем карбоксилирования при участии карбоксилтрансферазы и цепи восстановительных процессов превращается в янтарную кислоту, из которой образуется пропионовая:. К энтерококкам относят молочнокислые стрептококки кишечного происхождения, то есть они являются представителями нормальной микробиоты кишечника человека и животных. К энтерококкам относят два основных вида рода Enterococcus: Наиболее вредными являются маммококки Ent. Термоустойчивые молочнокислые палочки являются сильными кислотообразователями, и их развитие приводит к появлению излишне кислого вкуса творога, сметаны, простокваши. Эти бактерии могут выдерживать кратковременное нагревание до С, устойчивы к действию дезинфицирующих средств, что затрудняет борьбу с ними. Бактериофаги вызывают лизис разрушение клеток бактерий, входящих в состав заквасок, что снижает активность заквасок, увеличивает сроки выработки молочной продукции и ухудшает ее качество. Фаговая частица адсорбируется на бактериальной клетке, с помощью протеолитического фермента разрыхляет клеточную стенку, и ДНК бактериофага внедряется в цитоплазму клетки. В клетке начинается синтез ДНК фага и его белка, бактериальная генетическая система подавляется. Образуется большое количество до новых фаговых частиц, происходит лизис бактериальной клетки и высвобождение этих частиц. Они инфицируют новые клетки. Бактериофаги характеризуются специфичностью, то есть способностью размножаться в определенных видах бактерий. В свою очередь, бактериальные клетки имеют разную чувствительность к фагу. Для предотвращения развития фаговой инфекции на производстве используют многоштаммовые закваски, проводят частую смену штаммов бактерий в заквасках, тщательно моют и дезинфицируют помещения и оборудование. Бактериофаги чувствительны к ультрафиолетовому облучению, ионизирующей радиации, к кислотам. Заражение пищевых продуктов микроорганизмами и их токсинами происходит различными путями. Так, продукты могут заражаться вследствие санитарных и технологических нарушений производства, транспортировки, хранения и реализации продуктов. Продукты животного происхождения мясо, яйца, рыба могут быть поражены еще при жизни животного в случаях инфекционных заболеваний или бактерионосительства у животных. Однако при употреблении зараженных микробами пищевых продуктов не всегда возникают пищевые отравления. Продукт становится причиной заболевания только при массивном размножении в нем микроорганизмов или значительном накоплении токсинов. Этим объясняется наибольшее количество пищевых отравлений в теплый период года, когда создаются оптимальные условия для развития микроорганизмов [2]. Грибная порча или плесневение продуктов питания происходит при хранении их в условиях благоприятных для развития микроскопических грибов. Споры грибов попадают на продукты при транспортировке и хранении. Плесневение вызывается грибами родов Aspergillus, Mucor, Penicillium и др. Грибы образуют на поверхности продуктов пушистые налёты белого, серого, зелёного, голубоватого, жёлтого и чёрного цветов. Под микроскопом этот налёт представляет собой длинные переплетённые нити - мицелий. При созревании каждого спорангия образуется около сотни спор, из каждой споры вырастает новый мицелий, поэтому грибы размножаются но продуктах очень быстро. Микроскопические грибы поражают поверхность готовых изделий. Заплесневешие продукты могут содержать ядовитые вещества - микотоксины, поэтому продукты пораженные микроскопическими грибами непригодны в пищу. Для предотвращения плесневения пищевые продукты стерилизуют, консервируют и замораживают. Основные мероприятия по предотвращению плесневения является снижение зараженности спорами грибов воздуха производственных помещений, тары в которой храниться и транспортируется пищевая продукция, с помощью дезинфицирующих средств [1, 8]. В Республике Беларусь и во все мире действует огромное множество законов, технических нормативно-правовых актов ТНПА , директив, инструкций, концепций и других документов, направленных на обеспечение безопасности пищевых продуктов. Нормирование микробиологических показателей качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов осуществляется для большинства групп микроорганизмов по альтернативному принципу - нормируется масса объем , в которой ом не допускаются бактерии группы кишечных палочек, большинство условно-патогенных микроорганизмов, а также патогенные микроорганизмы, в том числе сальмонеллы и Listeria monocytogenes. Одной из систем, призванной устранить опасность для жизни и здоровья человека а впоследствии и сократить случаи возникновения инфекционных заболеваний и отравлении, связанных с употреблением пищевых продуктов, является система управления качеством и безопасностью пищевых продуктов на основе рисков и критических контрольных точек HACCP. Среди нормативно-технической документации можно выделить стандарты устанавливающие методы отбора и подготовки проб к анализам, метода контроля показателей безопасности и нормативы безопасности. Обеспечение безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов является основной целью и в других направлениях деятельности института. В их числе, например, разработка технологий производства новых видов продукции, испытания продукции по показателям безопасности, установленным в СанПиН 11 - 63 РБ 98, СанПиН 13 - 10 РБ , ГН 10 - РБ СанПиН 11 - 63 РБ 98 Санитарные правила и нормы устанавливают гигиенические нормативы качества и безопасности продовольственного сырья, пищевых продуктов, блюд для человека, а также требования по соблюдению указанных нормативов при операциях с пищей. С целью ограничения внутреннего облучения установлены республиканские допустимые уровни содержания радионуклидов цезия - и стронция - 90 в пищевых продуктах и питьевой воде - РДУ - 99 ГН 10 - РБ СанПиН 42 - Нормативы и методы микробиологического контроля продуктов детского питания, изготовленных на молочных кухнях системы здравоохранения. С целью повышения безопасности, качества и конкурентоспособности отечественной продукции институтом с было разработано 18 технических правовых актов СТБ , которые учитывают достижения отечественной и мировой науки в производстве пищевых продуктов, применение современного оборудования, новых материалов и упаковочных средств. При разработке и пересмотре ТНПА особое внимание уделяется требованиям, предъявляемым к сырью и готовой продукции, обеспечивающим ее безопасность, вносятся дополнительные требования при использовании пищевых добавок и генетически модифицированных компонентов. Разработаны также таблицы, в которых наглядно представлены сравнительные микробиологические показатели качества пищевых продуктов таблица 1 [3]. Таблица 1 - Сравнительные микробиологические показатели качества пищевых продуктов. Область его деятельности распространяется на плодоовощную, консервную, кондитерскую, крахмалопаточную, соляную, дрожжевую, пищекислотную продукцию. ИСО объединяет в одном документе принципы HACCP и требования основных стандартов, разработанных различными ассоциациями. В дополнение к ИСО изданы:. Руководство по применению ИСО Один из методов прогнозирования сроков хранения пищевых продуктов основывается на расчёте кинетических моделях роста микроорганизмов. Кинетические кривые роста микроорганизмов в закрытых системах периодическое культивирование имеют сложный характер рис 1. Выделяют несколько фаз в развитии культуры. В этот период перестраивается метаболизм клетки, синтезируются ферменты, специфичные к использованию новых субстратов, активируется биосинтез белка. Эта фаза достаточно строго описывается экспоненциальной кривой. Как правило, она переходит в фазу линейного роста 3 , характеризующуюся равномерным во времени линейным ростом культуры, имеет место отклонение от точек в сторону меньших значений количества клеток или продуктов, что служит экспериментальным критерием перехода культуры в линейную фазу роста. Это фаза замедления роста 4. В этих условиях культура развивается в режиме постоянства общего числа клеток. Режим характеризуется достаточно высокими скоростями отмирания клеток. При этом скорость прироста биомассы полностью компенсируется скоростью гибели и лизиса клеток. Рисунок 1 - Типичная кинетическая кривая роста популяции микроорганизмов: Принципиальной особенностью кинетики микробных популяций является зависимость скорости роста культуры от концентрации одного или нескольких наиболее важных компонентов среды, обеспечивающих биосинтетическую основу метаболизма. Эти компоненты, получившие название лимитирующих субстратов, в определенной степени регулируют скорость роста популяции. Расчёт сроков хранения основывается на определении количества лимитирующих субстратов. После определения количества субстрата прогнозируют как быстро произойдет истощение субстрата при развитии микроорганизмов. И из этих данных получают скорость роста микроорганизмов, которую используют при расчёте сроков хранения. Безопасность пищевых продуктов в настоящее время оценивается по следующим 4 группам микроорганизмов:. В зависимости от потребности в кислороде организмы подразделяются на аэробов и анаэробов. Анаэробные микроорганизмы живут без доступа кислорода, они могут присутствовать в герметически упакованных продуктах или продуктах упакованных под вакуумом. Яркие представители анаэробов - сальмонелла Salmonella и возбудитель ботулизма Clostridium botulinum. Последний может развиться только в герметичных упаковках без доступа кислорода. Аэробы же без кислорода жить не могут, например золотистый стафилококк Staphylococcus aureus. Количество МАФАМ можно рассматривать как общее микробное число, то есть содержание всех микроорганизмов в продукте. Ведь микроорганизмы могут попадать в продукт из тары, причем как бутылок, так и крышечек. Если в конечном продукте содержание МАФАМ превышает нормы, то это может в равной степени свидетельствовать как о нарушении санитарных условий на производстве или нарушении технологии, так и о нарушении условий хранения и реализации продукта в торговой сети. Эшерихом из остатков жизнедеятельности человека. Этот микроорганизм является постоянным обитателем толстого отдела кишечника человека и животных. К бактериям группы кишечных палочек относят роды Escherichia типичный представитель Е. Они характеризуются различными ферментативными свойствами и антигенной структурой. Бактерии группы кишечных палочек - это короткие длина 1 - 3 мкм, ширина 0,,8 мкм полиморфные подвижные и неподвижные грамотрицательные палочки, не образующие спор. Бактерии хорошо растут на простых питательных средах: На МПБ дают обильный рост при значительном помутнении среды; осадок небольшой, сероватого цвета, легко разбивающийся. Образуют пристеночное кольцо, пленка на поверхности бульона обычно отсутствует. На МПА колонии прозрачные с серовато-голубым отливом, легко сливающиеся между собой. На среде Эндо образуют плоские красные колонии средней величины. Красные колонии могут быть с темным металлическим блеском Е. Для лактозоотрицательных вариантов кишечной палочки B. Им свойственна широкая приспособительная изменчивость, в результате которой возникают разнообразные варианты, что усложняет их классификацию. Большинство бактерий группы кишечных палочек БГКП не разжижают желатина, свертывают молоко, расщепляют пептоны с образованием аминов, аммиака, сероводорода, обладают высокой ферментативной активностью в отношении лактозы, глюкозы и других сахаров, а также спиртов. Не обладают оксидазной активностью. К ним относится Е. Санитарно-показательное значение отдельных родов бактерий группы кишечных палочек неодинаково. Обнаружение бактерий рода Escherichia в пищевых продуктах, воде, почве, на оборудовании свидетельствует о свежем фекальном загрязнении, что имеет большое санитарное и эпидемиологическое значение. Считают, что бактерии родов Citrobacter и Enterobacter являются показателями более давнего несколько недель фекального загрязнения и поэтому они имеют меньшее санитарно-показательное значение по сравнению с бактериями рода Escherichia. При длительном применении антибиотиков в кишечнике человека также обнаруживают различные варианты кишечной палочки. Особый интерес представляют лактозоотрицателъные варианты кишечной палочки. Это измененные эшерихии, утратившие способность сбраживать лактозу. Они выделяются при кишечных инфекциях человека брюшном тифе, дизентерии и др. Они являются показателем свежего фекального загрязнения [6]. Человек контактирует с множеством микроорганизмов, но лишь немногие их них способны вызывать инфекционные болезни. Патогенность или отсутствие таковой - видовой, генетически детерминированный признак микроорганизма. Патогенный потенциал многих возбудителей зависит как от свойств, присущих конкретному микроорганизму, так и от состояния факторов защиты организма-хозяина. В зависимости от характера данных взаимоотношений все микробы подразделяют на патогенные, условно-патогенные и непатогенные. Патогенные микроорганизмы вызывают инфекционные заболевания у здоровых лиц. Такие возбудители произошли от свободноживущих видов, адаптировавшихся к существованию во внутренней среде организма. Патогенные микробы активно проникают в чувствительные организмы, так как паразитирование - важная часть их жизненного цикла. Адаптация к паразитированию в тканях проявляется специфическими поражениями, выделенными в отдельные нозологические формы. Условно-патогенные микроорганизмы, как правило, лишены болезнетворных свойств и не вызывают инфекционных заболеваний у здорового человека. Они нередко колонизируют кожу и слизистые оболочки, но способны и к длительному существованию во внешней среде. Условно-патогенные микробы вызывают поражения после пассивного переноса во внутреннюю среду организма например, при нарушении целостности анатомических барьеров. Поскольку эти микроорганизмы лишены доступа к тем или иным тканям, то заболевания не имеют выраженной специфичности и больше зависят от степени поражения органа, чем от патогенных свойств возбудителя. Важные условия их развития - массивность инфицирования и нарушения сопротивляемости организма. Чем более выражены эти нарушения, тем более широкий спектр микроорганизмов способен вызывать инфекционные поражения. Подразделение микроорганизмов на непатогенные и условно-патогенные виды имеет нечёткие границы. Например, сенная палочка Bacillus subtilis не патогенна для человека, но может вызывать тяжёлые глазные инфекции и бактериемию после попадания в кровь. Более правильна оценка паразитических свойств микроорганизма, так как в основе любого инфекционного процесса лежит феномен паразитизма. Паразитические микроорганизмы используют организм хозяина как источник питания, среду обитания и размножения. В соответствии со степенью паразитизма микроорганизмы разделяют на несколько типов. Некоторые резистентные штаммы условно-патогенных микроорганизмов представляют угрозу в основном для определенных групп пациентов высокого риска резистентные грибы для пациентов с неитропенией, резистентные штаммы P. Наибольшее опасение вызывают резистентные варианты золотистого стафилококка прежде всего, метициллин - оксациллин- резистентные стафилококки , которые в последнее время представляют угрозу не только для госпитализированных пациентов, но и для населения за пределами стационаров. Staphylococcus aureus - шаровидная грамположительная бактерия рода стафилококк, которую часто находят в носу и на коже людей. Стафилококк золотистый может вызывать широкий диапазон заболеваний начиная с легких кожных инфекций и до смертельно опасных заболеваний, таких как пневмония, менингит, остеомиелит, эндокардит, токсический шок и сепсис. Диапазон заболеваний простирается от кожных, мягкой ткани, респираторных, костных, суставных и эндоваскулярных до раневых инфекций. Он до сих пор является одной из четырех наиболее частых причин внутрибольничных инфекций, часто вызывая послехирургические раневые инфекции. Впервые обнаружен в году в Шотландском городе Абердине Александром Огстоном в гное из хирургических абсцессов. Впервые описан в году Оттомаром Розенбахом. Название бактерия получила благодаря своему внешнему виду под микроскопом: С момента открытия пенициллина и активного его использования против стафилококка, бактерия мутировала и в настоящее время большинство штаммов устойчивы к этому антибиотику, благодаря наличию у золотистого стафилококка пенициллиназы - фермента, расщепляющего молекулу пенициллина. Также к патогенным микроорганизмам относится Bacillus cereus - грамположительная, спорообразующая почвенная бактерия. Вызывает токсикоинфекции у человека. Хемоорганогетеротроф, факультативный анаэроб, способен к нитратредукции. Растёт на простых питательных средах, на плотных питательных средах обрузует плоские, мелкобугристые, слегка вогнутые, матовые колонии. Клетки крупные 1 x 3 - 4 мкм, эндоспоры расположены центрально, не превышают размер клетки. Вызывает пищевые токсикоинфекции у человека включая рвотный и диаррейный синдром , продуцирует энтеротоксины. Первоначально были описаны в Эренбергом как Vibrio subtilis, в были переименованы Коном в Bacillus subtilis. Является продуцентом некоторых полипептидных антибиотиков а также ферментов амилазы, протеазы получаемых промышленно. Клостридии Clostridium - род грамположительных, облигатно анаэробных бактерий, способных продуцировать эндоспоры. Отдельные клетки - удлинённые палочки, название рода происходит от греческого клптфед веретено. Многие виды, которые были отнесены к клостридиям по этому морфологическому признаку, позже были реклассифицированы. Эндоспоры могут располагаться центрально, эксцентрально и терминально. Диаметр эндоспор часто превышают диаметр клетки. Клостридии входят в состав нормофлоры желудочно-кишечного тракта и женских половых путей. Иногда их обнаруживают в полости рта и на коже. Род включает как свободно живущие виды например Clostridium pasteurianum , так и патогенные, например, возбудители столбняка, газовой гангрены и возбудитель ботулизма. Частыми возбудителями инфекции мочевыводящей системы являются бактерии рода Proteus из семейства Enterobacteriaceae. Это грамотрицательные подвижные аэробные палочки; на питательной среде расщепляют мочевину с образованием аммиака, плохо растут в кислой среде. Протеи, как и другие представители семейства Enterobacteriaceae, вызывают заболевания у людей только в тех случаях, когда выходят за пределы своего нормального места обитания пищеварительный тракт. Имеет место внутрибольничная передача протеев, распространение инфекции половым путем, а также - заражение при несоблюдении правил личной гигиены. Протеи нередко обнаруживают при хронических инфекциях мочевыводящих путей. Первое место по частоте обнаружения занимает Proteus mirabilis, затем следуют Proteus morganii и Proteus rettgeri. Реже выделяют Proteus vulgaris [7, 8]. Чтобы из смешанной элективной культуры получить требуемый микроорганизм в виде чистой культуры, необходимо добиться разобщения клеток, после чего обеспечить условия, в которых образуется их потомство. Чистой культурой принято считать популяцию, представляющую собой потомство одной клетки, либо споры, либо вирусной частицы. Существуют методы прямого выделения одной клетки при микроскопировании их обычно применяют для относительно крупных организмов и косвенные методы, основанные на разобщении клеток на плотных средах с последующим формированием колоний либо в жидких средах с последующим формированием суспензий. Получение чистых культур путём разобщения клеток в питательных средах. Наиболее простым и чаще других используемым способом получения чистой культуры является чашечный метод Коха, который состоит в физическом разобщении клеток на плотной среде, в результате чего одна клетка формирует одну колонию, состоящую из генетически однородных особей - потомков единственной клетки. Посев методом Коха на поверхность плотной среды в одной чашке Петри. Для получения изолированных колоний элективную культуру следует развести. При этом бывает трудно предсказать относительное содержание в суспензии требуемых микроорганизмов, и поэтому обычно делают высевы из нескольких серийных разведений чаще из разведений 10 -4 - 10 -6 ;. Посев методом Коха на плотные среды в трёх чашках Петри. Этот способ обычно даёт наилучшие результаты при высеве смешанных культур, то есть позволяет выявить наибольшее разнообразие морфологических типов колоний;. Данный метод выбирают в тех случаях, когда существует уверенность, что требуемый организм находится в элективной культуре в достаточно высокой концентрации. Здесь, также как и при высеве на поверхность плотной среды в одной чашке Петри, требуется произвести разведения элективной культуры. Обычно производят засев разведений 10 4 - 10 -6 ;. Разведение суспензий в плотных питательных средах. Данный метод используют для облигатных анаэробов. Его суть состоит в том, что в пробирки для разведения элективной культуры вместо физиологического раствора вносят расплавленную агаризованную питательную среду, охлаждают её до 0 С, после чего совершают все те манипуляции по разведению суспензии. Делают 6 - 10 последовательных разведений с шагом Затем среду в пробирках быстро охлаждают и заливают поверхность слоем стерильной смеси парафина и вазелинового масла в отношении 3: Для некоторых анаэробов можно использовать все способы получения изолирования колоний на поверхности плотной среды как для аэробов , но после посева культивирование следует осуществлять в анаэростате. Для выделения чистых культур микроорганизмов, не формирующих колонии на плотной среде, пользуются методом предельных разведений в жидкой среде, пользуются методом предельных разведений в жидкой среде. Данный способ удаётся реализовать лишь в том случае, когда требуемый микроорганизм преобладает в смешанной популяции. Разведение элективной культуры следует производить с тем расчётом, чтобы при внесении аликвот в серию пробирок с питательной средой среднее число клеток составляло бы менее 0,05 на пробирку. Это достигается, например, при инокуляции аликвот по 1 мл в пробирок из мл суспензии, содержащей всего 5 клеток. В таком случае вероятность того, что пробирки, в которых регистрируется рост микроорганизмов, попала всего 1 клетка, составляет 0, Получение чистых культур прямым выделением клеток при микроскопировании. Методы данной категории требуют специального лабораторного оборудования и не применимы для выделения очень мелких клеток и неклеточных существ. Он позволяет выделять крупные клетки цианобактерий, дрожжей, мицелиальных грибов, водорослей, простейших. Суть метода состоит в следующем. Разводят элективную культуру в стерильной питательной среде с тем расчётом, чтобы в небольшом объёме 0,01 мл содержались одиночные клетки обычно получают разведения 10 -6 - 10 На поверхность нескольких стерильных покровных стёкол бактериологической петлёй наносят микрокапельки разведённой суспензии соблюдают правила асептики. Затем вновь микроскопируют и растущие культуры микробиологической петлёй переносят в жидкие или на плотные питательные среды. Выделение клеток с помощью микроманипулятора. Микроманипулятор представляет собой устройство, которым оснащают микроскоп, позволяющее с помощью специальной микропетли или микропипетки извлекать из суспензии одну клетку. Все действия осуществляются под микроскопом. Получив при высеве элективной культуры на плотную среду изолированные колонии, нельзя быть уверенным в том, что они однородны. Обычно в составе колоний, сформированных при первичном высеве элективной культуры, обнаруживаются представители разных видов. Это объясняется тем, что многочисленные представители смешанных популяций на среде определённого составе могут расти медленно или не расти вовсе, но и не погибать. В таком случае невозможно заметить на среде их присутствие. Для глубинного посева одну колонию выделяют из толщи среды петлёй или вырезают стерильным скальпелем маленький фрагмент среды с изолированной колонией, помещают в пробирку с 1 мл физиологического раствора, тщательно ресуспендируют и разводят перед высевом в - раз. Полученные изолированные колонии анализируют по морфологическим признакам и снова одну типичную колонию рассевают аналогичным образом. Обычно рассев повторяют раза. Для этого можно воспользоваться визуальным, микроскопическим контролем или высевом на ряд питательных сред. При визуальном контроле просматривают рост микроорганизмов по штриху и сравнивают морфологию полученных изолированных колоний - они должны быть однородными. Микроскопический контроль помогает установить степень однородности клеток в составе колонии. Чистая культура многих микроорганизмов, как правило, морфологически однородна; допустимо лишь незначительное варьирование размеров клеток. Однако этот метод неприменим для полиморфных микроорганизмов коринеформных бактерий, микобактерий, актиномицетов и др. Высев на ряд разнообразных по составу полноценных питательных сред мясопептонный агар, питательный агар, сусло-агар, картофельный агар и т. При описании и идентификации бактерий изучают их культуральные свойства, морфологию, организацию клетки, физиолого-биохимические особенности, химический состав клеток, содержание гуанина и цитозина ГЦ в ДНК и другие фено- и генотипические признаки. При этом необходимо соблюдать следующие правила, работать с чистыми культурами, применять стандартные методы исследования, а также использовать для инокуляции клетки, находящиеся в активном физиологическом состоянии. Культуральные свойства, то есть характерные особенности роста бактерий на плотных и жидких питательных средах обычно используют для их характеристики, однако для идентификации применяют довольно редко. Морфологическая характеристика и организация клеток бактерий включает такие признаки, как форма и размеры клеток, их подвижность, наличие жгутиков и тип жгутикования, способность к спорообразованию. Полезным может оказаться также выявление в клетках характерных мембранных систем и органелл хлоросом, карбоксисом, фикобилисом, газовых вакуолей и т. Первостепенное значение для систематики бактерий придается окраске клеток по Граму и строению их клеточных стенок. Важно определить такие признаки, как отношение бактерии к молекулярному кислороду, температуре, рН среды, солености, освещенности и другим факторам среды. В данную группу признаков входит также перечень субстратов, утилизируемых в качестве источников углерода, азота и серы, потребность в витаминах и других факторах роста, образование характерных продуктов метаболизма, наличие некоторых ферментов. Для этого используют специальные тесты. Многие тесты, применяемые для обнаружения перечисленных признаков их иногда называют рутинными тестами , важны для диагностики и широко используются в медицинской микробиологии. Их постановка требует значительных затрат времени, большого количества сложных сред и реактивов, соблюдения стандартных условий проведения. Для ускорения и облегчения процесса идентификации некоторых микроорганизмов, имеющих главным образом медицинское значение, разработаны различные тест-системы: APIE, Enterotube, Mycolube, Patho-Tec, СИБ, ПБДЭ и другие. Например, система Enterotube, предназначенная для идентификации энтеробактерий, представляет собой пластиковую камеру с 12 ячейками, содержащими окрашенные диагностические среды. Засев всех сред производится поступательно-вращательными движениями через камеру петли с посевным материалом. О положительном или отрицательном результате теста судят по изменению цвета среды, разрыву агара тест на газообразование , или после введения специальных реактивов тест на образование индола, реакция Вогес-Проскауэра. Каждый признак обозначают определенной цифрой, поэтому полученные данные можно ввести в компьютер с соответствующей программой и получить ответ о таксономическом положении исследуемого штамма. При идентификации симбиотических и паразитических патогенных бактерий важно установить специфичность симбионта к хозяину, а также устойчивость к антимикробным веществам и фагам фаготипирование. Определение состава клеток бактерий также имеет значение для их систематики хемосистематика. Хемотаксономические методы могут быть важными, в частности, для тех групп бактерий, у которых морфологические и физиологические характеристики широко варьируются и недостаточны для проведения их удовлетворительной идентификации. В состав клеточных стенок разных прокариот входит несколько классов уникальных гетерополимеров: Это лежит в основе иммунохимических методов их идентификации. В качестве хемотаксономического маркера иногда используют также липидный и жирнокислотный состав клеток бактерий. Интенсивное изучение жирных кислот стало возможным с развитием метода газо-хроматографического анализа. Различия в составе липидов используют для идентификации бактерий на уровне рода и даже вида. Однако этот метод имеет определенные ограничения, поскольку содержание жирных кислот в клетках может зависеть от условий культивирования и возраста культуры. В систематике некоторых бактерий учитывается состав хинонов и других переносчиков электронов, а также пигментов. Важная информация о взаимном родстве бактерий может быть получена при изучении клеточных белков - продуктов трансляции генов. На основании изучения мембранных, рибосомных, суммарных клеточных белков, а также отдельных ферментов сформировалось новое направление - белковая таксономия. Спектры рибосомных белков относятся к числу наиболее стабильных и используются для идентификации бактерий на уровне семейства или порядка Спектры мембранных белков могут отражать родовые, видовые и даже внутривидовые различия. Однако характеристики химических соединений клетки не могут использоваться для идентификации бактерий изолированно от других данных, описывающих фенотип, поскольку нет критерия оценки значимости фенотипических признаков. Нередко при идентификации бактерий, а иногда и других микроорганизмов, например дрожжей, используют метод нумерической или адансоновской таксономии. В ее основе лежат идеи французского ботаника М. Adanson , предложившего различные фенотипические признаки, поддающиеся учету, считать равноценными, что позволяет количественно выразить таксономические дистанции между организмами в виде отношения числа положительных признаков к общему числу изученных. Степень сходства устанавливается на основании количества совпадающих признаков и выражается в виде коэффициента сходства Значение коэффициента сходства может меняться от 0 до 1. Коэффициент 1 означает полную идентичность, а 0 - полное несходство. Оценки комбинаций признаков производят с помощью компьютера. Нумерическая таксономия может применяться при оценке сходства между таксонами микроорганизмов только невысокого ранга роды, виды. Она не позволяет делать непосредственные выводы относительно генетического родства микроорганизмов, однако в известной степени отражает их филогенетические свойства. Анализ химического состава пищевых продуктов для потребления качественной по составу пищи. Изменение содержания воды в пищевых продуктах в процессе их перевозки и хранения. Классификация углеводов, жиров и белков. История применения при производстве копченых продуктов нитрита и нитрата натрия, их влияние на организм человека. Содержание нитритов и нитратов в продуктах питания. Основные методы исследования, вольтамперометрия. Нитриты и нитраты в мясных продуктах. Понятие и методы идентификации продовольственных товаров. Фальсификация продовольственных товаров, понятие и виды. Анализ методов обнаружения наиболее фальсифицируемых продуктов. Органолептические и физико-химические показатели и критерии идентификации. Потребительские свойства, методы и алгоритм идентификации меда. Штриховое кодирование в идентификации пищевых продуктов. Упаковка и маркировка меда натурального, реализуемого в универсаме ТД "На Немиге". Идентификация меда органолептическим методом. Организация и проведение таможенной экспертизы: Порядок проведения товароведческой оценки пищевой и потребительской ценности и качества круп на таможенном посту, методики оценки пищевых продуктов. Требования к хранению продовольственных товаров на торговых предприятиях. Разработка плана снижения порчи мясных продуктов с помощью модернизации холодильного оборудования. Требования к срокам годности и условиям хранения пищевых продуктов. Последствие продажи потребителю товара ненадлежащего качества. Технологическое обоснование установления пролонгированного срока годности на продукт. Сроки годности пищевых продуктов. Понятие идентификации продовольственных товаров. Сущность и виды фальсификации продовольственных товаров, методы подделки. Анализ методов обнаружения и защиты наиболее фальсифицируемых пищевых продуктов импортного и отечественного производства. Общее положение, место и роль идентификации и фальсификации товаров. Виды, способы, методы идентификации и фальсификации товаров. Способы и методы обнаружения фальсификации отдельных групп продовольственных товаров. Наиболее вредные виды пищевых добавок. Общие характеристики свежих овощей и грибов, их ассортимент и классификация, пищевая ценность, кулинарное назначение. Современные требования к качеству корнеплодов на примере картофеля и топинамбура. Факторы, влияющие на сохранность пищевых продуктов. Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т. PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах. Главная Коллекция рефератов "Otherreferats" Маркетинг, реклама и торговля Методы анализа видового состава и идентификации микроорганизмов. Методы оценки развития микроорганизмов в водной среде и пищевых продуктах, бактериальной и грибной порчи продуктов. Влияние антимикробных веществ на содержание и видовой состав микроорганизмов. Взаимоотношение грибов и бактерий в смешанной микрофлоре. Конечными продуктами одного из типов брожения являются масляная и уксусная кислоты, диоксид углерода и водород: Суммарное уравнение сбраживания глюкозы пропионовокислыми бактериями: В дальнейшем одна часть пировиноградную кислоты подвергается окислительному декарбоксилированию с образованием уксусной кислоты: Другая часть пировиноградную кислоты путем карбоксилирования при участии карбоксилтрансферазы и цепи восстановительных процессов превращается в янтарную кислоту, из которой образуется пропионовая: В дополнение к ИСО изданы: Если в конечном продукте содержание МАФАМ превышает нормы, то это может в равной степени свидетельствовать как о нарушении санитарных условий на производстве или нарушении технологии, так и о нарушении условий хранения и реализации продукта в торговой сети Кишечные палочки лат. Для разобщения клеток аэробных микроорганизмов используют следующие методы: При этом бывает трудно предсказать относительное содержание в суспензии требуемых микроорганизмов, и поэтому обычно делают высевы из нескольких серийных разведений чаще из разведений 10 -4 - 10 -6 ; 2. Этот способ обычно даёт наилучшие результаты при высеве смешанных культур, то есть позволяет выявить наибольшее разнообразие морфологических типов колоний; 3. Для получения изолированных колоний анаэробов выбирают: Обычно производят засев разведений 10 4 - 10 -6 ; 2. Степень сходства устанавливается на основании количества совпадающих признаков и выражается в виде коэффициента сходства 1: Химический состав продовольственных товаров. Экспериментальные исследования оценки содержания нитратов и нитритов в копченых продуктах. Организация хранения товаров, снижения потерь и быстрой порчи мясных продуктов питания в магазине. Идентификация и фальсификация продовольственных товаров. Ассортимент, товароведная характеристика и требования к качеству различных видов овощей и грибов. Другие документы, подобные "Методы анализа видового состава и идентификации микроорганизмов".
Рено меган 2008 тест драйв видео
Пословицы и поговорки про детей
Ремонт в ванной своими руками фото варианты
Интерьер дворасвоими руками
На сколько ставить вводной автомат